硬皮病的分类标准确定之后，给硬皮病的诊断带来了很大的保证，但是分类标准不完全等同于诊断标准，部分硬皮病患者的诊断要通过实验室及辅助检查的结果才能确定。实验室及辅助检查内容包括以下的几个：
    1  血清学相关抗体检测
    以人类喉癌细胞（human epithelial tumor line HEp-2）作底物来检测抗核抗体，90％以上系统性硬化患者为阳性，免疫学检测荧光核型可为斑点型、核仁型或抗着丝点型。
    50％～96％的局限皮肤型硬皮病可检出抗着丝点抗体（anticentromere antibody, ACA），而弥漫皮肤型硬皮病的阳性率则小于10％。ACA很少见于其它结缔组织病，被认为是局限皮肤型硬皮病的标记抗体，该抗体阳性者易出现毛细血管扩张、皮下钙质沉着，而限制性肺病则较阴性者少。ACA的滴度不随时间和病程而变化，ACA阳性不仅预示预后良好，而且对仅有雷诺现象的早期局限皮肤型硬皮病患者有重要诊断价值。
    抗DNA拓扑异构酶Ⅰ抗体（也称为抗Scl-70抗体）见于20％～40％弥漫皮肤型硬皮病患者，通常认为是硬皮病的标记抗体，该抗体与弥漫性皮损、肺间质性病变有关。抗DNA拓扑异构酶Ⅰ抗体阴性的弥漫皮肤型硬皮病患者为抗RNA聚合酶I或Ⅲ阳性。
    系统性硬化其它抗核抗体少见，如抗核糖核蛋白（nRNP）抗体阳性率约20％，抗双链DNA抗体阴性或低滴度阳性，抗Sm抗体均为阴性；抗SSA和抗SSB抗体阳性者预示合并干燥综合征；抗心脂抗体IgG型阴性或IgM型低滴度阳性。另外，30％系统性硬化可出现类风湿因子阳性。
    2  组织病理学检查
    纤维化和微血管闭塞是系统性硬化患者所有受累组织和器官的特征性改变。临床常取手伸侧皮肤组织做病理检查。早期真皮间质水肿、胶原纤维肿胀，胶原纤维间和真皮上层小血管周围有淋巴细胞浸润，以T细胞为主。以后真皮和皮下组织胶原纤维增生，真皮明显增厚，真皮血管壁增厚，管腔狭窄甚至闭塞。晚期出现萎缩性改变，表皮变薄，皮肤附属器及皮脂腺萎缩，汗腺减少，真皮深层和皮下组织可见钙盐沉着。
    3  甲皱襞毛细血管镜检查
    显微镜检查系统性硬化患者的甲皱襞毛细血管显示，多数毛细血管袢模糊，血管袢数显著减少，而异常血管袢增多，伴有水肿和渗出，血管支明显扩张和弯曲，袢顶增宽，血流迟缓，有的伴出血点。甲皱襞出血可能是早期诊断硬皮病谱性疾病的一项指标。有报道认为系统性硬化的甲皱微循环变化与内脏器官受累的严重程度相一致，因此可间接反映内脏器官受累情况。